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Transgenomics(IDT) 突變檢測試劑盒的結(jié)構(gòu)

2018-04-23      1463

    全部在一個優(yōu)化的緩沖體系中完成,非常簡單,去除未突變模板,突變效率高達90%,不需要連接步驟,反應(yīng)結(jié)束后可以直接轉(zhuǎn)化。提供陽性對照質(zhì)粒puc19和突變引物,便于分析失敗原因,Transgenomics(IDT) 突變檢測試劑盒可用于制備點突變,缺失突變和插入突變。在轉(zhuǎn)化時千萬別把它帶入轉(zhuǎn)化反應(yīng),否則會嚴(yán)重影響轉(zhuǎn)化效率。在涂板前通過離心濃縮的辦法,把所有被轉(zhuǎn)化后的細菌全部涂布到含有適當(dāng)抗生素的平板上培養(yǎng)過夜。通常會得到50個以下的克隆,可按常規(guī)方法制備質(zhì)粒并測序。

    實驗時在酶標(biāo)板中加入對照血清和待檢樣本,經(jīng)溫育后若樣品中含有試劑盒疫病毒抗體,則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后;再加入酶標(biāo)記物,與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物,在孔中加tmb底物液,與酶反應(yīng)形成藍色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān)。試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存,實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物a、b液時,避免使用帶金屬部分的加樣器,使用干凈的塑料容器配置洗滌液,使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。